Диаскин тест как альтернатива Манту

Диагностика туберкулёза с помощью «Диаскинтест»

Альтернатива Манту «Диаскинтест» – это продукт генной инженерии российских разработчиков с использованием нанотехнологий в медицине. В технологии его производства используются не убитые палочки Коха, а рекомбинантный туберкулёзный аллерген. 
Действие теста основано на развитии иммунной реакции. Пробу проводят с целью диагностики туберкулёза следующим категориям лиц: 

  • для уточнения диагноза у лиц после пробы Манту,
  • лицам высокой группы риска заболеваемости с учётом эпидемической обстановки,
  • лицам, направленным в тубдиспансер для дополнительного обследования,
  • при дифференциальной диагностике инфекции туберкулёза и поствакцинальной реакции,
  • при оценке эффективности лечения. 

Педиатр направляет детей в тубдиспансер исходя из результатов туберкулиновой пробы Манту в следующих случаях: 

  • при первичном инфицировании туберкулёзом; 
  • при реакции Манту размером более 6 мм; 
  • при нарастании размеров папулы в течение ряда лет. 

Новая технология с использованием «Диаскинтест» позволяет точно выявлять только реально больных туберкулёзом. Ранее сделанная вакцинация БЦЖ не влияет на результаты пробы «Диаскинтест». 

Тест рассчитан для внутрикожного введения детям по достижении 1 года и взрослым. Пробу диаскинтестом делают в дозе 0,1 мл на внутренней поверхности предплечья строго внутрикожно с использованием туберкулинового шприца. После постановки пробы образуется белесоватого цвета папула диаметром 7–10 мм. Результат пробы оценивается через 3 дня путём измерения поперечного размера участка гиперемии. 

Оценка результата теста по измерению гиперемии папулы следующая: 

  • Реакция отрицательна, если нет покраснения и припухлости на месте папулы. 
  • Реакция сомнительна, если имеется гиперемия, но нет инфильтрата (припухлости папулы). 
  • Реакция положительна, если имеется инфильтрат любого размера. 

«Диаскинтест» имеет побочные действия. Они могут проявляться в недомогании, кратковременном повышении температуры. Кроме того, внутрикожные пробы «Диаскинтест», как и Манту, имеют противопоказания

  • аллергические реакции; 
  • индивидуальная непереносимость туберкулина или «Диаскинтест»; 
  • соматические заболевания; 
  • эпилепсия; 
  • карантин в детских коллективах. 

«Диаскинтест» во время обострения хронических заболеваний временно откладывается. Согласно приказу Минздрава России от 29 декабря 2014 года «Диаскинтест» ежегодно делают всем детям в возрасте от 8 до 17 лет.

Туберкулез: краткая характеристика

Туберкулезом называется хроническое инфекционное заболевание, вызываемое палочкой Коха. Возбудитель очень устойчив к воздействиям различного характера, способен сохранять активность на предметах в течение нескольких месяцев.

Основной объект поражения – органы дыхательной системы, но специфические микобактерии способны атаковать другие структуры организма. Характеризуется особой опасностью, быстрым распространением воздушно – капельным путем, длительностью и сложностью лечения. Распространение инфекции от больного человека к здоровому происходит от зараженной слюны, разбрызгиваемой при кашле или чихании. Попадая в новую среду обитания, инфекция медленно, но активно начинает распространяться, «обживая» здоровый организм. Период развития и активизации может продолжаться несколько лет, при этом носитель вируса может не подозревать о том, что является разносчиком инфекции. Заражение чаще происходит весной или осенью, в момент наибольшей активизации вируса.

Туберкулез диагностируется несколькими методами, в том числе с помощью анализов – прививки (пробы) на реакцию Манту или исследования кровотока. Принципиальное различие между ними – реакция на пробу совершается внутри организма, анализ кровотока – во внешних условиях, с помощью лабораторного способа.

ПЦР диагностика

Сегодня во многих клиниках можно пройти анализ крови на туберкулез вместо манту. Что это такое? Исследование называется ПЦР – полимеразная цепная реакция, оно является высокочувствительным. Это обусловлено тем, что с его помощью можно выявить даже 1-2 микробактерии возбудителя. Достоверность ПЦР очень высокая– в 98% происходит выявление патологических клеток. Поэтому ученые считают полимеразную цепную реакцию важным открытием в микробиологической науке за последнее время. ПЦР диагностика — это метод выбора Всемирной организации здравоохранения при туберкулезе.

Диагностика ПЦР на туберкулез эффективна и при контроле качества лечения, так как с помощью исследования врач может определить устойчивость бактерий к лекарствам

Устойчивость к лекарственным препаратам при лечении является очень серьезной проблемой, она снижает эффективность лечения в разы, поэтому так важно для врача-фтизиатра знать о ней у конкретного пациента. Это помогает правильно определить тактику лечения

Также анализ крови на туберкулез просто необходим для людей, которые уже перенесли это заболевание, для выявления рецидивов. Исследование дает возможность диагностировать рецидив на раннем этапе, что позволяет вовремя начать лечение и предупредить развитие серьезных осложнений. Свою эффективность анализ на туберкулез доказал и в тех случаях, когда его локализация внелегочная.

К анализу крови ПЦР, так же как и к иммуноферментному исследованию не нужны особые подготовки. Иногда требуется перед исследованием отменить на некоторое время прием определенных лекарств. Об этом предупредит лечащий врач, который и направит на исследование.

Никаких возрастных ограничений для проведения исследования на микробактерии туберкулеза нет. Анализ крови ПЦР делают взрослым и детям. Так как он абсолютно безопасен. Но все же в школах и садиках чаще детям делают пробу Манту, а ПРЦ диагностику больше используют для взрослых людей. Особенно для тех, у кого ранее был туберкулез.

Проведение исследование ПЦР

Сдать свою кровь на туберкулез можно в специализированной лаборатории. Кровь при анализе на туберкулез собирается в пробирку с веществом, которое не дает ей сворачиваться

Важно соблюдать все условия стерильности, а также запрещено взбалтывать пробирки с кровью на туберкулез при анализе, так как будет затруднен процесс отделения ее клеток от плазмы

Далее происходит лабораторный процесс, при котором отделяется плазма от клеток, и лаборант через микроскоп определяет есть ли клетки возбудителя в биологическом материале. Заключительный этап исследования основывается на создании определенных условий для клеток. То есть в осадочный материал добавляются вещества, которые спровоцируют реакцию, также при этом должны быть определенные температурные показатели. Таким веществом является фермент транскриптаза. В результате этих действий получается обновленный материал ДНК, который должен расшифровываться специалистом. После этих действий лаборант может дать точное заключение о наличии или отсутствии туберкулеза у человека.

Биологическим материалом для приведения анализа ПЦР может быть, как кровь, так и моча. Для проведения анализа мочи на ПЦР необходима утренняя порция в количестве 20-30 мл. Для проведения исследования крови потребуется 1 мл венозной крови.

Расшифровка

Расшифровки анализов ПЦР можно получить в довольно короткий срок – 1-2 дня. А в некоторых случаях его проводят всего за 4-5 часов. Это уместно если результаты нужны срочно, перед экстренной операцией и т.д.

ПЦР расшифровка может быть простой и сложной. В первом случае результат будет отрицательным и никаких патологических клеток обнаружено не будет, или же их будет очень мало. Сложная ПЦР расшифровка нужна при высоком содержании клеток, так как при этом необходимы точные расчеты. Есть определенные нормы, по которым квалифицированный специалист расшифровывает анализ крови на туберкулез. При этом он может диагностировать стадию и причины заболевания.

Преимущества и недостатки пробы Манту

Самый популярный анализ на предмет выявления туберкулеза известен, как проба Манту. Методика используется для выявления туберкулёзной инфекции на основании появляющейся специфической местной кожной реакции (там, где был введён туберкулин). К преимуществам пробы Манту относятся простота, безболезненность, а также то, что её можно применять для обследования детей.

В своё время туберкулиновая проба, действительно, была наиболее точной, но с тех пор минуло много десятков лет, и появились другие методы диагностики – более информативные и точные способы выявления туберкулёзной палочки в организме. Однако из-за сплошного характера проверок у дошкольников и школьников она так и остается «безальтернативной» методикой туберкулинодиагностики, причиной чего, в большей степени, является бюрократия.

Тест Манту широко применяется для выявления аллергии (перед прививкой БЦЖ), а также в качестве контроля послепрививочной конверсии. Туберкулинодиагностика не предполагает введение живых или инактивированных туберкулезных микобактерий, что является плюсом, так как нет вероятности заражения, пусть и минимальной. Разрешается выполнять пациентам с хроническими заболеваниями сердца, желудочно-кишечного тракта, опорно-двигательного аппарата и так далее.

Реакция организма на Манту позволяет дать предварительное заключение о наличии или отсутствии туберкулёза, и это – положительный момент. Но ответ – не всегда однозначен, и это – отрицательная сторона. Каждый организм уникален, поэтому туберкулиновая проба может иногда давать ложные отклики. То есть положительная реакция может наблюдаться и при отсутствии болезни.

Противопоказания к проведению Манту

К пробе Манту имеются противопоказания, поэтому необходим предварительный осмотр врача. Минусов у данного диагностического метода много. Для проведения теста на туберкулез иногда лучше прибегнуть к альтернативным способам.

Один из недостатков – неоднозначность. Распространено ошибочное мнение, что «большая Манту» говорит о развитии туберкулёзного процесса. Установлено, что размеры, превышающие определённый порог, не помогают в однозначном толковании теста. Увеличенная папула не даёт достоверных сведений об активности или неактивности заболевания, об отдалённом инфицировании или недавнем.

У 60% больных туберкулёзом бывают сомнительные пробы, а положительные – нередко фиксируются у тех, кто совершенно здоров, то есть высока вероятность ложной реакции. Туберкулиновая проба может дать позитивный результат после иммунизации БЦЖ. Она не предоставляет информацию о форме заболевания и локализации процесса, вероятны осложнения.

Фиксировались случаи ложноположительных реакций при попадании химических веществ на место инъекции (например, шампуня, хотя точных доказательств нет), а также при употреблении некоторых продуктов и лекарственных препаратов (и здесь тоже нет однозначного мнения о точных корреляциях).

На пробу влияет индивидуальная реакция организма на туберкулин, наличие глистной инвазии и хронических заболеваний. Сложности выявления палочки Коха есть и в случае, если человек – аллергик, имеются кожные патологии.

С момента выздоровления от болезни, протекавшей в острой форме, должно пройти не менее месяца. Аналогичные правила относятся к карантинным мероприятиям в ДОУ и школах (Манту ставится только через месяц после их окончания)

Такой же интервал важно выдержать, если делают прививку

Форма выпуска препарата – раствор для инъекций.

Какой анализ крови сдают на туберкулез

ПЦР-исследование направленно на выявление возбудителей инфекционных заболеваний

Для диагностики туберкулеза делают анализ крови, который могут проводить двумя методами:

Иммуноферментный анализ. Такое исследование позволяет установить, имеются ли в крови антитела к бактериям, которые вызывают недуг. В основном с помощью этой методики определяются иммуноглобулины. Преимуществом ИФА считается высокая чувствительность и точность результатов. Зачастую эта методика используется, когда Манту показало положительную реакцию, или как альтернативный способ исследования.
Общее исследование крови. Данный метод является неотъемлемым при подозрении на различные заболевания. Однако результаты при туберкулезе будут такими же, как при других инфекционно-воспалительных процессах. Поэтому такой анализ считается дополнительным, а не альтернативным методу Манту.
ПЦР (полимеразная цепная реакция). Это исследование позволяет определить наличие в организме возбудителей, которые вызывают заболевание. При этом обнаруживаются антигены или частичка ДНК бактерии, а не антитела к ним

Поэтому данный метод помогает выявить болезнь на ранней стадии, что крайне важно для своевременного лечения. ПЦР- диагностика дает точные и достоверные результаты. Исследование способно показывать патогенные микроорганизмы, вызывающие туберкулез, по человеческому ДНК

Анализ позволяет установить количество микобактерий. Данный анализ не имеет побочных реакций. Кроме того, его можно проводить пациентам всех возрастных групп.

Направление на полимеразную цепную реакцию дают в таких случаях:

  • При положительном результате Манту.
  • При подозрении на туберкулез.
  • Для контроля эффективности лечения заболевания.
  • Когда у пациента имеются противопоказания к проведению Манту.
  • Для выявления рецидива болезни.
  • Если у пациента с иммунодефицитом поражены легкие.

Как подготовиться к процедуре, проведение анализа

Залог достоверного результата – правильная подготовка к анализу крови!

Чтобы альтернативные Манту методики дали правильный и точный результат, важно знать, как подготовится к сдаче крови. К основным правилам подготовки относятся:

К основным правилам подготовки относятся:

  1. Исключение употребления антибиотиков, которые способны искажать результаты диагностики.
  2. Проведение анализа на голодный желудок ранним утром (после последнего употребления пищи должно пройти не менее пяти часов).
  3. Отказ от алкоголесодержащих напитков за несколько дней до диагностики.
  4. Избегание физического и психоэмоционального перенапряжения.
  5. Ограничение употребления жирной еды.

При ПЦР кровь поддается смешиванию в специальной пробирке с бактерией, вызывающей туберкулез. После этого в материал добавляют определенные ферменты и смотрят на реакцию. Для иммуноферментного анализа кровь берут из вены.

Расшифровка исследования: норма и отклонения от нее

Результат может быть либо положительный, либо отрицательный

Результаты ПЦР-диагностики расшифровываются таким образом:

  • Если в ДНК не выявлено возбудителя туберкулеза, то результат является отрицательным. В таком случае уменьшается подозрение на наличие заболевания.
  • Когда были обнаружены бактерии, провоцирующие туберкулез или их следы, тогда говорят о положительном результате. Такая расшифровка свидетельствует о том, что человек может болеть туберкулезом.

Результаты иммуноферментного анализа могут быть такими:

  1. Положительный – при обнаружении иммуноглобулина amg к туберкулезу. В таком случае возможно инфицирование, при котором отсутствуют клинические симптомы, или протекание активной формы заболевания.
  2. Отрицательный – иммуноглобулины не были обнаружены.

При туберкулезе в общем анализе крови будет увеличенная скорость оседания красных кровяных клеток (СОЭ) – более 50 единиц. Также повышенный показатель эозинофилов при заболевании.

Прочие осложнения

Изучаемая альтернатива Манту – это, как и любой другой укол, вмешательство в организм человека. Поэтому не исключена та или иная реакция на введенный белок. Уже было сказано, что в идеале Диаскинтест не подразумевает наличие побочных эффектов или каких-то серьезных последствий. Не стоит вводить соответствующий препарат людям с ослабленным иммунитетом. Это может повлечь за собой инфицирование

Именно по этой причине требуется максимально обращать внимание на противопоказания

Какие еще ситуации можно считать нормальными после того, как ребенку была поставлена альтернатива реакции Манту? Таких проявлений не слишком много. К ним относят следующие ситуации:

  1. Повышение температуры. Это нормальная реакция практически на любой укол. Обычно сбивать температуру у ребенка или взрослого не нужно. Вероятность сильного повышения температуры тела максимально низкая. Но если это произошло, повторный Диаскинтест делать не рекомендуется. Температура, при которой требуется воздержаться от повторения процедуры, составляет около 38-38,5 градуса по Цельсию. Если она держится долгое время, то это будет еще и прямым противопоказанием для проведения диагностики в будущем.
  2. Общее недомогание. Тоже распространенный вариант развития событий. Не только альтернатива Манту влечет за собой подобный результат. Обычно слабость проходит через несколько часов. Не стоит загружать и напрягать ребенка. Если он после “вакцинации” слаб, то необходимо позволить ему немного отдохнуть.
  3. Головная боль. Довольно часто дети жалуются, что после Диаскинтеста у них болит голова. Такое явление не должно пугать родителей. Именно таким образом очень часто организм реагирует на введение белка. Как и все остальные эффекты, головная боль не требует никакого лечения. Если она перерастает в мигрень или мешает нормальной работоспособности, следует принять обезболивающее. О подобных случаях нужно будет предупреждать врачей при последующих уколах.

Все это, как уверяют медики, нормальная реакция организма на введенный препарат. Поэтому в России хотят отказаться от Манту. Тест-альтернатива, который называется Диаскинтестом, получает большое распространение.

Особенности реакции Манту

В отличие от анализа крови на туберкулез, который проводится исключительно в лабораторных условиях, манту является иммунологическим тестом, проводящимся, преимущественно, на местном уровне.

В целом процедура осуществляется очень просто: под кожу вводится экстракт микобактерий, который называется туберкулин. Внешняя реакция кожи на этот элемент показывает, как организм взаимодействует с возбудителем, и взаимодействует ли в целом. Сам раствор совсем безболезненный, а его доза ничтожно мала, поэтому у ребенка укол практически не вызывает неприятный ощущений.

Затем, по прошествии 72 часов (или 3 дней) следует измерять образовавшееся на месте укола уплотнение. Именно от общего диаметра реакции и зависит результат. Чем сильнее воспаление – там больше Т-лимфоцитов «притянулось» на место укола, и соответственно – тем сильнее организм оказывает взаимодействие.

  1. Воспаление 1-4 миллиметра – организм, скорее всего, не знаком с возбудителем туберкулеза и не имеет иммунитета.
  2. Воспаление 4-16 миллиметров – иммунитет находится в норме, организм сопротивляется вирусу туберкулеза.
  3. Воспаление 17 и более – скорее всего, ребенок заражен туберкулезом.

Если уплотнение оказалось больше, чем ожидалось, и в качестве реакции появились язвочки, ранки, пузырьки, значит нужны дополнительные тесты. А они проводятся в виде анализа крови. То есть, утверждать, что манту можно делать вместо лабораторного анализа или анализ вместо манту – неправильно, поскольку проба манту является первичной диагностикой. Исследование крови необходимо, если организм дал положительную реакцию.

Разница в том, что при определенных подозрениях, анализ крови можно сделать незамедлительно, поскольку он не имеет никаких противопоказаний. Манту – другое дело, ведь существует ряд определенных условий, при которых пробу на туберкулез нельзя проводить ни в коем случае:

  • Если у ребенка имеются какие-либо кожные заболевания;
  • если в медкнижке значатся острые хронические болезни в стадии обострения;
  • если малыш находится в аллергическом состоянии (к примеру, пищевая аллергия, дерматит или аллергия на медикаменты);
  • если ребенок болеет эпилепсией.

В таких случаях реакция организма и результаты тестирования могут быть самыми непредсказуемыми, так что при временных осложнениях со здоровьем, лучше отложить манту до лучших времен. В свою очередь, хроническая несовместимость — это как раз тот случай, когда анализ крови на туберкулез лучше использовать вместо манту.

«Диаскинтест»

Наука, однако, не стоит на месте, и альтернативы пробе Манту существуют. Вопрос лишь в том, насколько они альтернативны. После расшифровки в 1998 году генома M. tuberculosis появилась возможность разработать абсолютно новые тесты: отечественную кожную пробу «Диаскинтест» и анализы крови . Однако на роль теста-заменителя пробы Манту больше всех претендует именно «Диаскинтест».

Благодаря тому, что в состав «Диаскинтеста» входит не коктейль из полисахаридов, липидов и белков, а только синтетический антиген плюс вспомогательные вещества (фенол, натрия хлорид, «Твин-80»), он является более высокоспецифичным, чем препарат для пробы Манту. То есть при его применении фиксируется меньше ложноположительных результатов, а также аллергических реакций неинфекционного характера .

Что касается оценки активности туберкулезного процесса, то в этом «Диаскинтест» на голову опережает конкурентов, потому что для него разработана градация положительного результата (табл. 2). То есть чем больше возбудителя в организме, тем больший размер будет иметь папула. А это значит, что у большинства туберкулезных больных реакция на этот тест более выражена, чем у латентных носителей (единственное, здесь снова имеет место субъективная оценка результата). Прибавим к этому то, что «Диаскинтест» позволяет выявлять носителей с высоким риском развития туберкулеза и снижать количество необоснованной терапии , а также снижение выраженности реакции на него у больных, получающих курс антибиотиков , и получим весьма ценное конкурентное преимущество перед туберкулиновой пробой.

РеакцияРазмер гиперемии и папулы
ОтрицательнаяНет папулы и/или гиперемии, «укольчитая реакция» до 2 мм
СомнительнаяНаличие гиперемии при отсутствии папулы
Положительная:Папула любого размера:
— слабовыраженная положительная реакцияДо 5 мм
— умеренно выраженная реакция5–9 мм
— выраженная реакция10–14 мм
— гиперергическая реакция

Однако и у «Диаскинтеста» есть недостатки:

  • Он не чувствителен к M. bovis и, следовательно, не может диагностировать туберкулезный процесс, вызванный этим видом микобактерии. Конечно, число подобных случаев невелико, но все-таки это снижает эффективность теста.
  • Согласно исследованиям, у «Диаскинтеста» достаточно высокая чувствительность в выявлении туберкулезной инфекции как у детей — 90–96,7%, так и у взрослых — 78–81,5% . Тем не менее остаются приблизительно 10–20% случаев, которые он пропускает.
  • «Диаскинтест» может быть отрицательным у туберкулезных больных с выраженными нарушениями работы иммунной системы из-за тяжелого течения болезни, а также у ВИЧ-инфицированных (в этом случае чувствительность теста зависит от уровня Т-лимфоцитов CD4+ ).

Особенности анализа крови

В целом, для такого исследования можно использовать абсолютно любые биологические жидкости: желудочную слизь, мокроту, мочу, спинную жидкость и, конечно, кровь

Для постановки более точного диагноза, как правило, проводится целый ряд тестов, где анализ крови занимает очень важное место. В таком случае, сдать кровь придется в обязательном порядке

Туберкулез путешествует внутри организма по лимфатическим сосудам. Этот способ распространения еще называется диссеминацией. Также, в случае обнаружения микобактерий в крови, можно предполагать о зарождении распада в легком, в который были вовлечены и сосуды. Попадание возбудителя в кровь, к тому же, провоцирует поражение других органов.

Для того чтобы поставить диагноз при анализе крови на туберкулез, нужно найти в одной пробе не менее 10 микроорганизмов. Хотя и такой результат нельзя считать достаточно верным, так как не все микобактерии являются патогенными и провоцируют развитие болезни.

Потребуется сдать кровь в пробирку, где предварительно будет находится специальное вещество, которое не дает ей свернуться.

Далее в крови отделают клеточный осадок от плазмы, после чего можно попытаться определить наличие возбудителя под микроскопом. И это еще не конечный этап, ведь для большей достоверности нужно провести специальную реакцию, добавив к осадку специальные ферменты. При определенных температурных условиях происходит процесс преобразования генетического материала, по которому и судят о наличии или отсутствии болезни.

Вышеописанный способ диагностики называется ПЦР, что расшифровывается как «полимеразная цепная реакция». Благодаря ему, можно не только определить имеющиеся заболевания, а еще и назначить действенную терапию. Если говорить об эффективности такого теста, то анализ ПЦР определяет правильный результат в 98% процентах случаев. Ложный же результат может возникнуть вследствие нарушения правил проведения процедуры – если в исследуемый материл попадут сторонние элементы. Также, иногда анализ проводится в неудачный цикл размножения микроорганизмов, и тогда исследуемых частиц может быть просто недостаточно.

В то же время данный метод имеет список своих достоинств:

  • Анализ достаточно быстрый, и если результат нужно узнать как можно скорее, вся процедура может занять от 4-4,5 часов;
  • при помощи ПЦР можно диагностировать туберкулез легких, что при других методах практически исключено;
  • этот тест помогает выявить определенный фрагмент, имеющийся только в конкретном возбудителе.

Несмотря на все это, многие по-прежнему задаются вопросом, почему не сделать манту вместо специального анализа крови?

Поделитесь в социальных сетях:vKontakteFacebookTwitter
Напишите комментарий